{{{sourceTextContent.title}}}

Interazioni lipido-proteina rivelarici dalla Fluorescence Spectroscopy

{{{sourceTextContent.subTitle}}}

Il gruppo di ricerca degli strumenti di Edinburgh ha collaborato con il Dott. Tim Rasmussen, un ricercatore all'università di Aberdeen per segnalare su interazione lipido-proteina per mezzo dei nostri spettrometri di fluorescenza.

{{{sourceTextContent.description}}}

INTRODUZIONE

Le interazioni fra i bilayers del lipido e le proteine della membrana possono essere rivelate dalla registrazione della fluorescenza dei residui del triptofano e dall'estinzione collisionale dagli atomi del bromo limitati alle catene dell'acido grasso del lipido. Queste interazioni importanti sono ben più facili da rilevare usando la fluorescenza che estigue che con altri metodi biofisici come per esempio cristallografia dei raggi X. Scegliendo il luogo del triptofano e la posizione del bromo sulla catena dell'acido grasso, l'alta specificità strutturale è ottenuta.

METODI e MATERIALI

Gli spettri di emissione sono stati registrati in uno spettrometro di fluorescenza FLS980 dotato di doppi monocromatori dell'emissione e di eccitazione. I polarizzatori della calcite sono stati utilizzati nell'eccitazione ed emissione, mentre un rivelatore del tubo di fotomoltiplicatore (Hamamatsu, R928P) con l'abitazione 1s è stato utilizzato. Il FLS980 fornisce uno strumento flessibile e sensibile per registrare l'emissione che tiene conto l'ottimizzazione delle regolazioni, mentre i polarizzatori sono convenienti da reprimere gli effetti che interferiscono con la fluorescenza di triptofano. Per questo motivo, i polarizzatori sono regolati a 90° all'eccitazione e a 0° all'emissione per minimizzare l'effetto di dispersione della luce.

RISULTATI - DISCUSSIONE

La struttura di cristallo dei MscS mostra “le pale„ insolite, vede l'inserzione di figura 3, che sembri essere situato nella membrana e sia presumibilmente importante per il rilevamento di tensionamento. I MscS è un homoheptamer con “le pale„ sul dominio della membrana ed in più su un grande dominio citosolico.

Le gamme di controllo di campioni del lipido senza MscS sono state sottratte dagli spettri grezzi e sono visualizzate nella figura 2. Allora, l'estinzione frazionaria è stata calcolata sopra l'intero spettro, vede figura 3.